Carcinome épidermoïde de la bouche chez la souris moc1 / moc2 / femelle

Informations de base

Nom de la cellulePour:Carcinome épidermoïde de la bouche chez la souris moc1 / moc2

Lignée cellulairePour:C57BL/6 Cxcr3-/-

Source de cellulesPour:À l'étranger

Identification des cellulesPour:La qualification Str est passée

Forme cellulairePour:Lymphoblastoïde - mère polygonale ressemblant à une cellule, épitaxiée + croissance en suspension

Milieu de culturePour:Dmem (avec NaHCO3 1,5g / l) (basmed - aw - 013) + FBS 10% + P / S1% 500ml milieu: IMDM: F10 / F12 = 2: 1313ml: 157ml milieu + fbs10% (50ml) + 2,5mg / 500ml insuline + 20µg / 500ml + 2,5µg / 500ml EGF + P / S1% Bi - anti, 1%.

Conditions de culturePour:Phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 degrés Celsius, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%

Fond cellulairePour:Le carcinome épidermoïde de la bouche (OSCC) est un sous - ensemble important de cancers de la tête et du cou, les six principaux cancers courants. Le principal facteur de risque pour l'apparition d'OSCC est l'exposition aux carcinogènes, qui distingue cette sous - population de cancers de la tête et du cou des cancers de la tête et du cou induits par le virus de l'oncome humain. Malgré les progrès réalisés dans les tests, la chirurgie, la chimiothérapie et la radiothérapie, le pronostic de l’oscc est resté stable pendant des décennies. De plus, au moment du diagnostic, environ les deux tiers des patients atteints d’oscc souffraient d’une maladie localement avancée, entraînant une augmentation de la morbidité et de la mortalité.

Utilisation cellulaire: pour la recherche scientifique seulement

Précautions

1. L'activité des cellules moc1 est particulièrement élevée, la valeur ajoutée est très rapide, il n'est pas recommandé que la densité de passage soit trop grande, alors que le choix d'un peu épais, la longueur égale à environ 80% du passage, il est difficile de digérer, il est recommandé d'ajouter 0,25% EDTA à l'intérieur après avoir bien mélangé toutes les cellules sont en contact, placé dans un incubateur pour la digestion, la durée est d'environ 3 - 4 minutes après avoir été retiré

2. Sur le côté de l'appareil de culture pour effectuer le battement pour aider à la chute des cellules, le processus de battement dure environ 2 minutes avant de perdre la plupart des cellules, si la proportion de chute n'est pas encore beaucoup, vous pouvez également remettre dans l'incubateur pour continuer la digestion après 1 - 2 minutes pour sortir à nouveau pour la chute de battement, etc. 80 - 90% des cellules sont tombées après la digestion est terminée, centrifuger le surplomb et remettre en bouteille, la dispersion est uniforme.

3. L'adhérence cellulaire moc2 et l'analogie cellulaire conventionnelle ne sont pas particulièrement fortes. Le cycle de multiplication n'est pas aussi rapide que moc1. Traité avec des méthodes de digestion conventionnelles.

Livraison à température normale

Après réception de l'incubateur de désinfection et de repositionnement de la bouteille t25 pendant 2 - 3 heures après l'observation de la densité et de l'état de la photo 2 - 3 rétroactions à la vente, la densité peut être transmise. Avant le rapport de passage de 1: 2, et ainsi de suite après le passage complet à nouveau, il est recommandé de conserver un flacon entier dans un tube de congélation de 1 ml, un autre flacon continue le passage, la congélation répétée 2 - 3 seulement après l'amplification pour faire l'expérience, au cas où une Situation soudaine causerait une souche cassée.

Livraison de glace sècheLivraison régulière de cellules lyophilisateur 2, réanimation 1, un autre stand - by, la première réanimation n'a pas réussi lorsque la réanimation strictement selon les exigences du fabricant, la seconde, aucun cas de réanimation réussie, la récupération instantanée conservée photo de réanimation nous informe.

Cellules plaquées

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) - 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger correctement le temps de digestion), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après ajouter 3 - 4 ml de milieu contenant 10% de FBS pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 / boîtes de pétri de 6 cm dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 Selon la réalité.

Lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

5. Le milieu de culture utilisé pour le transport (milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour cultiver les cellules, veuillez remplacer le milieu de culture nouvellement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructions pour cultiver les cellules.

Cellules en suspension

Cellules cultivées à l'état de suspension, peut maintenir l'état de croissance des cellules en ajoutant du milieu à la bouteille de culture, en général, la densité cellulaire maintenue à 1 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶ / ML (différentes cellules pour différentes exigences de densité) peut maintenir la croissance normale des cellules. Si nécessaire flacon fractionné peut recueillir la suspension cellulaire dans le tube de centrifugation à 1000 RPM, centrifuger pendant 5 min, défausser le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture après remise en suspension, distribuer la suspension cellulaire dans un nouveau flacon t25 dans un rapport de 1: 2, ajouter 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les exigences des instructions pour maintenir la vitalité de croissance des cellules, le passage ultérieur selon la situation réelle dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 4.

Biosécurité

Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'une table de sécurité biologique de niveau 2, veuillez prendre soin de la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est toujours recommandé d'utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.