Hep - 53.4 cellules cancéreuses du foie de souris

Informations de base

Nom de la cellulePour:Hep - 53.4 cellules cancéreuses du foie de souris

Alias de cellulesPour:HEP-53.4 ; 53.4; Cellules cancéreuses du foie de souris

Source de cellulesPour:Allemagne

Identification des cellulesPour:La qualification Str est passée

Forme cellulairePour:Cellules épithéliales, croissance murale

Base de culturePour:Dmem (avec NaHCO3 1,5 g / l) (basmed - aw - 013) + FBS 10% + P / S1%

Conditions de culturePour:Phase gazeuse: air, 95%; CO2, 5%. Température: 37 degrés Celsius, l'humidité de l'incubateur est de 70% - 80%

Conditions de congélationPour:Pas de gel de sérum, stockage d'azote liquide

Fond cellulairePour:Dérivé d'un carcinome hépatocellulaire primaire chez la souris C57BL / 6J, ces hépatocytes de souris représentent fidèlement le carcinome hépatocellulaire et fournissent un modèle précieux pour l'étude de ce type de carcinome hépatocellulaire, les synonymes hep - 53.4 et 53.4, qui facilitent l'identification et le référencement croisé, le carcinome hépatocellulaire est un problème de santé majeur, Ces cellules sont capables d'effectuer des études précises sur leurs voies moléculaires, leurs interactions cellulaires et leurs stratégies thérapeutiques, et ces cellules, originaires de Mus musculus (souris), fournissent un système de modèles pertinents pour comprendre et développer des approches thérapeutiques pour le carcinome hépatocellulaire.

Utilisation des cellulesPour:Pour usage scientifique seulement

Période de production cellulaire: en stock, environ 1 semaine

Précautions

1. Centrifugation régulière de cellules de collection de digestion.

2. Après la centrifugation, enlever le tube de centrifugation du surnageant interne, ajouter environ 1 ml de cellules en suspension lourde pour bien mélanger, il est recommandé de secouer doucement ou de souffler doucement les cellules, mettre dans l'incubateur pour digérer les cellules, digérer encore environ 1 min.

3. Après une bonne digestion, soufflez doucement la suspension cellulaire avec un pistolet à pipette pour disperser la masse cellulaire, ajoutez rapidement 3 - 5 ml de milieu de culture contenant du sérum pour mélanger afin de terminer la digestion et d'éliminer par centrifugation.

4. Ajouter environ 5 ml du milieu de culture correspondant pour les cellules et mélanger, accéder au flacon / boîte de pétri proportionnellement.

5. Regardez sous le microscope pour voir si les cellules sont uniformément dispersées en cellules individuelles, s'il y a une petite quantité de masse de petites cellules qui ne peuvent pas être re - digérées, de sorte qu'après l'application de la paroi à la croissance cellulaire stable avant de dissiper les cellules.

Livraison à température normale

Après réception de l'incubateur de désinfection et de repositionnement de la bouteille t25 pendant 2 - 3 heures après l'observation de la densité et de l'état de la photo 2 - 3 rétroactions à la vente, la densité peut être transmise. Avant le rapport de passage de 1: 2, et ainsi de suite après le passage complet à nouveau, il est recommandé de conserver un flacon entier dans un tube de congélation de 1 ml, un autre flacon continue le passage, la congélation répétée 2 - 3 seulement après l'amplification pour faire l'expérience, au cas où une Situation soudaine causerait une souche cassée.

Livraison de glace sècheLivraison régulière de cellules lyophilisateur 2, réanimation 1, un autre stand - by, la première réanimation n'a pas réussi lorsque la réanimation strictement selon les exigences du fabricant, la seconde, aucun cas de réanimation réussie, la récupération instantanée conservée photo de réanimation nous informe.

Hep - 53.4 cellules cancéreuses du foie de souris

Cellules plaquées

1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.

Ajouter 0,25% (P / v) 0,53 mm EDTA dans un flacon de culture (flacon t25 1 - 2 ml, flacon T75 2 - 3 mL), placer dans un incubateur à 37 ° C pendant 1 - 2 minutes pour la digestion (les cellules difficiles à digérer peuvent prolonger le temps de digestion de manière appropriée), puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après ajouter 3 - 4 ml de milieu contenant 10% de FBS pour terminer la digestion.

3. Bien mélanger doucement et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 3 - 5 min, jeter le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture et bien souffler. La suspension cellulaire est divisée dans de nouveaux flacons t25 / boîtes de pétri de 6 cm dans un rapport de 1: 2, 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les instructions sont ajoutés pour maintenir la viabilité de croissance des cellules, et les passages suivants sont effectués dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 5 Selon la réalité.

Lyophilisation cellulaire: après réception des cellules, il est recommandé de lyophiliser un lot de semences cellulaires pour une utilisation expérimentale ultérieure au cours des 3 premières générations de culture.

5. Le milieu de culture utilisé pour le transport (milieu de culture de perfusion) ne peut plus être utilisé pour cultiver les cellules, veuillez remplacer le milieu de culture nouvellement formulé conformément aux conditions de culture cellulaire des instructions pour cultiver les cellules.

Cellules en suspension

Cellules cultivées à l'état de suspension, peut maintenir l'état de croissance des cellules en ajoutant du milieu à la bouteille de culture, en général, la densité cellulaire maintenue à 1 × 10⁵ ~ 1 × 10⁶ / ML (différentes cellules pour différentes exigences de densité) peut maintenir la croissance normale des cellules. Si nécessaire flacon fractionné peut recueillir la suspension cellulaire dans le tube de centrifugation à 1000 RPM, centrifuger pendant 5 min, défausser le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de solution de culture après remise en suspension, distribuer la suspension cellulaire dans un nouveau flacon t25 dans un rapport de 1: 2, ajouter 6 - 8 ml de nouveau milieu configuré selon les exigences des instructions pour maintenir la vitalité de croissance des cellules, le passage ultérieur selon la situation réelle dans un rapport de 1: 2 ~ 1: 4.

Forme de transport

Basse température: 1ml tube de congélation emballé pour le transport de la glace sèche, après réception - 80 degrés réfrigérateur conservé pendant la nuit après le transfert à l'azote liquide ou la réanimation directe, si la glace sèche a été volatilisée propre, le bouchon du tube de congélation est tombé, cassé et les cellules sont contaminées, s'Il vous plaît contactez - nous immédiatement.

Température normale: les cellules viables réanimées par le flacon t25 sont expédiées à température normale et, après réception, elles sont traitées selon la méthode utilisée après réception des cellules.

Biosécurité

Toutes les cellules animales sont considérées comme potentiellement dangereuses sur le plan biologique et doivent être manipulées à l'intérieur d'une table de sécurité biologique de niveau 2, veuillez prendre soin de la protection, tous les déchets liquides et les ustensiles qui ont été en contact avec ces cellules doivent être éliminés après stérilisation.

2. Il est toujours recommandé d'utiliser des gants de protection, des vêtements et de porter un masque de protection lors de la réanimation des cellules conservées congelées. Remarque: l'immersion du lyophilisateur dans l'azote liquide peut fuir et se remplir lentement d'azote liquide. Lors de la décongélation, la transformation de l'azote liquide en phase gazeuse peut provoquer l'explosion du récipient ou le soufflage de son couvercle avec une force dangereuse, créant ainsi des débris volants causant des blessures aux personnes.

Une attention particulière

Les cellules se développent bien dans le milieu dmem (contenant 1,5 g / lnahco3), la plupart du dmem contenant des concentrations plus élevées de NaHCO3 (3,7 G / l), et si les cellules sont cultivées avec du milieu dmem (3,7 G / l NaHCO3), la concentration de CO2 doit être augmentée (7% - 10%).