Cellules souches mésenchymateuses hépatiques embryonnaires de canard

Introduction aux cellules:

Séparation sèche du mésenchymateux hépatique embryonnaire à partir de tissus hépatiques embryonnaires; Le foie est un organe dans le corps où la fonction métabolique est prédominante et joue un rôle dans le corps comme la désoxydation, le stockage du sucre du foie, la synthèse des protéines sécrétrices, etc.; Le foie fabrique également de la bile dans le système digestif. Le foie est le grand organe dans les organes internes de l'organisme, situé dans la position abdominale de l'organisme, sous le diaphragme droit, à l'extrémité antérieure de la vésicule biliaire et devant le rein droit, au - dessus de l'estomac. Le foie est la grande glande Digestive dans le système digestif de l'organisme, qui est brun rougeâtreVOrganes glyphes. Le foie est le principal organe de synthèse de l'urée et un organe important du métabolisme. Cellules souches mésenchymateuses (MSC), est une cellule souche à fort potentiel d'auto - renouvellement et de différenciation multidirectionnelle. Dans différentes conditions d'induction, il peut se différencier en plusieurs cellules tissulaires autres que les cellules hématopoïétiques et avoir des effets de soutien hématopoïétique, d'immunomodulation, de réparation tissulaire, etc. Cellules souches mésenchymateuses (MSC), une cellule souche adulte à potentiel d'auto - renouvellement et de différenciation multidirectionnelle, présente dans la moelle osseuse, le tissu adipeux, le sang ombilical et de nombreux tissus fœtaux. Il peut sécréter une variété de Cytokines et de facteurs de croissance qui favorisent les cellules souches hématopoïétiques (HSC), la prolifération et la différenciation.MSCEgalement immunomodulateur, anti - inflammatoire et réparateur tissulaire, il atténue la maladie du greffon contre l'hôte (GVHD), et autres complications liées à la transplantation. Contient dans les cellules hépatiques non parenchymateuses embryonnairesMSCEt en plus grande quantité, peut devenir une cellule de semence.

Introduction à la méthode:

Embryon de canard isolé en laboratoire adoption sèche mésenchymateuse hépatique-La méthode de digestion combinée de collagénase est préparée, la quantité totale de cellules est d'environ5×10⁵cellules/La bouteille.

Détection de qualité:

Mésenchymateuse hépatique embryonnaire de canard isolée en laboratoireCD44Identification par immunofluorescence, pureté possible90%Ci - dessus et ne contient pasVIH-1Et,HBVEt,VHC, mycoplasmes, bactéries, levures et champignons, etc.

Information sur la culture:

Milieu de culture: contientFBSEt,FEGEt,bFGFEt,pénicillineEt,StreptomycineAttendre

Fréquence de changement de liquide: chaque2 - 3Changement de liquide une fois par jour

Caractéristiques de croissance: Wall

Forme cellulaire: comme fibroblaste

Caractéristiques de la génération: transmissible3 - 5Génération autour

Sucs digestifs:0,25%

Conditions de culture: phase gazeuse: air,95%;CO2，5%

Cycle de culture in vitro limité de souches mésenchymateuses hépatiques d'embryons de canard; Il est recommandé d'utiliser un milieu de croissance adapté et le bon mode opératoire pour la culture afin de garantir un excellent état de culture de cette cellule.

Étapes de passage cellulaire:

Si la densité cellulaire atteint 80% - 90%, la culture de passage peut être effectuée.
1. Jeter le surnageant de culture et laver les cellules 1 - 2 fois avec du PBS sans ions calcium et magnésium.
Ajouter 2 ml de digestat (0,25% Trypsin - 0,53 mm EDTA) dans un flacon de culture, placer dans un incubateur à 37 ° C pour la digestion pendant 1 - 2 minutes, puis observer la digestion des cellules sous un microscope, si la plupart des cellules deviennent rondes et tombent, rapidement revenir à la table d'opération, tapoter quelques flacons de culture après avoir ajouté une petite quantité de milieu pour terminer la digestion.
3. Appuyez sur 6 - 8 ml / flacon pour compléter le milieu de culture, bien agiter et bien aspirer, centrifuger à 1000 RPM pendant 4 minutes, retirer le surnageant, ajouter 1 - 2 ml de milieu de culture et bien souffler.
4. Distribuer la suspension cellulaire dans de nouvelles boîtes contenant 8 ml de milieu ou dans des flacons dans un rapport de 1: 2 à 1: 5.

Étapes de la réanimation cellulaire:

Le lyophilisateur contenant 1 ml de suspension cellulaire est décongelé sous agitation rapide dans un bain - Marie à 37°c, 4 ml de milieu sont ajoutés pour bien mélanger. Centrifuger 4 min à 1000 RPM, éliminer le surnageant et bien souffler après addition de 1 - 2 ml de milieu. Toutes les suspensions cellulaires sont ensuite ajoutées au flacon de culture pour une nuit de culture (ou la suspension cellulaire est ajoutée à une boîte de 10 cm, environ 8 ml de milieu sont ajoutés pour une nuit de culture). Changez de liquide le lendemain et vérifiez la densité cellulaire.

Étapes de lyophilisation cellulaire:

La lyophilisation cellulaire peut être effectuée lorsque la croissance cellulaire est en bon état. La bouteille t25 ci - dessous à titre d'exemple;
1. Lorsque les cellules sont congelées, après avoir abandonné le milieu de culture, le PBS lave le fond du flacon après 1 - 2 fois Ajouter 1 ml, après que les cellules deviennent rondes et tombent, ajouter 2 ml de milieu de culture pour terminer la digestion, peut être compté à l'aide d'une plaque de comptage de globules.
2.1000rpm centrifuger pendant 5 minutes pour enlever le surnageant. Resuspendre avec du sérum et ajouter du DMSO jusqu'à une concentration finale de 10%. Mélanger rapidement après l'ajout de DMSO, distribuer dans le lyophilisateur par quantité de 1 ml, en notant que le lyophilisateur est bien identifié. La société est basée sur un nombre de cellules de lyophilisateur supérieur à 1x106 cellules par lyophilisateur.
3. Placez le réservoir de congélation dans la boîte de refroidissement du programme, mettez - le dans le réfrigérateur à - 80 degrés, au moins 2 heures plus tard dans le stockage par irrigation à l'azote liquide. Enregistrez la position de la lyophilisation pour la récupérer la prochaine fois.
Produits vendus par la société:

Facteur trilobé de rat3(TFF3)Kit, nom anglais:Kit ELISA TFF3

Kit ELISA pour molécule d'ansduction de signal de souris (Smad1)Molécules de transduction du signal chez la souris(Smad1)Kits de réactifs

Peptide lié à la calcitonine de rat, CGRPELISAKitPeptides liés au gène Calcitonine de rat(CGRP)pcrKit de détection sous - ensemble

CLIAKitforHABPELISAKitProtéine de liaison à l'acide hyaluronique de rat

Cystéase cellulaire-7(CASPASE-7)Kit de quantification de fluorescence active20Une fois

Ratverylateappearingaigen, VLAELISAKitAntigènes tardifs chez le rat(VLA)Spécifications du kit:96T / 48T

Soluble chez la sourisELe sélectif(sE-sélectine)Kits de réactifs

Soluble chez la sourisEndogline (ENG/sCD105)Kits de réactifs

Enzyme granulaire de sourisB(Gzms-B)Kits de réactifs

Enzyme granulaire de sourisA(Gzms-A)Kits de réactifs

Protéine kinaseCAnticorps

3Cadre de lecture Chromosome ouvert17Anticorps

CST6Souris recombinantesCystatine E / CST6Les protéinesprotéines

Inhibiteurs de la cystéine3(CST3)Protéines recombinantesCystatine recombinante 3 (CST3)

CSNK2A2Personnes reconstituéesCSNK2A2 / CK2A2Les protéinesprotéines

protéine CSNK1G2 humainPersonnes reconstituéesCSNK1G2Les protéines

Protéine KLRC1 CynomolgusSinge Cynomolgus reconstituéNKG2A / NKG2 / CD159A / KLRC1Les protéines(Fc)étiquette) et

Récepteur de l'angiotensine II (récepteur II du géographe de type II 0,5)Récepteurs de l'angiotensine II(Antigènes) et

protéine CSNK1G2 humainPersonnes reconstituéesCSNK1G2Les protéines

FZD10Souris recombinantesFrizzled-10 / FZD10Les protéines(Fc)étiquette(Fc)étiquette) Protéines

IL20RB protéine ratRat reconstituéIL20RBLes protéines(Fc)étiquette) et

TEKPersonnes reconstituéesTie2 / CD202b / TEKLes protéines(Sa & GSTétiquette) Protéines

Cellules souches mésenchymateuses hépatiques embryonnaires de canardProtéines de gel de souris(Gelsoline) ELISA pcrKits de détection

Kit ELISA facteur de coagulation sanguine humain XII (F XII)Personnes Ⅻ(F)Ⅻ) etKits de réactifs

Peptide libérateur de pro-gazine humain, ProGRPELISAKitLa gastrine humaine libère des précurseurs peptidiques(ProGRP)pcrKit de détection sous - ensemble

Acide humain20-hydroxyeicosateaenoicacide,12-HETEKit homme12Acide hydroxyeicosanetétraénoïque(12-HETE)Spécifications du kit:96T / 48T

Le champignon/Saccharidase de fibre de levure(cellobiase)Kit de quantification colorimétrique active20Une fois

Apolipoprotéine de sourisApolipoprotéine de sourisH(Apo-H)Spécifications du kit:96T / 48T