Rat il - 2sR ELISA Kit méthode de lavage:

1. Machine de lavage automatique de plaque: ajouter 350 μl de liquide de lavage par puits, 60 secondes entre l'injection et l'aspiration. Lavez la plaque 5 fois.

2. Laver la plaque à la main: jeter le liquide à l'intérieur des trous, sécher sur du papier absorbant propre, ajouter 350 μl de liquide de lavage par trou, laisser tremper pendant 1 à 2 minutes, aspirer (paroi de la plaque intouchable) ou secouer le liquide à l'intérieur de la plaque de marquage enzymatique, sécher sur du papier absorbant épais. Lavez la plaque 5 fois.

Chaque réactif doit être équilibré à température ambiante avant le début de l'expérience; Lors de la formulation des réactifs ou des échantillons, les deux doivent être bien mélangés et essayer d'éviter les cloques.

1. échantillon supplémentaire: trou blanc, trou standard, trou d'échantillon à tester séparément. Les puits blancs plus la dilution de l'échantillon 100 μl, les puits restants séparément avec la norme ou l'échantillon à tester 100 μl, faites attention à ne pas avoir de bulles d'air, lors de l'ajout de l'échantillon au fond de la plaque de marquage enzymatique, essayez de ne pas toucher la paroi des puits, Agitez doucement et mélangez. La plaque de l'enzyme est recouverte de film et incubée à 37 ° C pendant 2 heures. Pour garantir la validité des résultats expérimentaux, utilisez une nouvelle solution standard pour chaque expérience.

2. Vider le liquide, égoutter, ajouter 100 μl de liquide de travail Detection AB (formulé dans les 15 premières minutes d'utilisation) dans chaque puits, plaque enzymatique plus membrane, incuber à 37 ° C pendant 1 heure.

3. Vider le liquide à l'intérieur du trou, égoutter, laver la plaque 3 fois, laisser tremper 1 - 2 minutes à chaque fois, environ 350 μl / trou, égoutter et tamponner le liquide à l'intérieur du trou sur le papier absorbant pour sécher.

Sec 4.per puits plus HRP liquide de travail Conjugate (formulé dans les 15 minutes avant l'application provisoire) 100 μl, plus le film, incuber à 37 ° C pendant 1 heure.

5. Jeter le liquide à l'intérieur du trou, égoutter, laver la plaque 5 fois, la méthode synchrone 3.

6. 100 μl par puits plus la solution de substrat, la plaque d'enzyme plus la membrane de revêtement 37 ℃ incuber à l'abri de la lumière pendant environ 15 minutes (raccourcir ou prolonger selon le rendu des couleurs réel, si nécessaire, mais pas plus de 30 minutes. Il peut être terminé quand un gradient prononcé apparaît Dans les puits standard).

7. Ajouter 50 μl de liquide de terminaison par puits, terminer la réaction, à ce moment - là, le bleu tourne vers le jaune. L'ordre d'addition du liquide de terminaison doit être le plus identique possible à celui du liquide de substrat.

8. Mesurer immédiatement la densité optique (valeur OD) de chaque puits à une longueur d'onde de 450 nm avec un étalon enzymatique. L'alimentation de l'étalon enzymatique doit être activée à l'avance, l'instrument doit être préchauffé et le programme de détection bien réglé.

9. Une fois l'expérience terminée, remettre les réactifs inutilisés au réfrigérateur à la température de conservation prescrite et les conserver jusqu'à la fin de leur période de validité.