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52, route de Chengwei, district de Jiading, Shanghai
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Il n'y a pas beaucoup de problème avec les produits PCR laissés à température ambiante pendant un jour ou deux, mais ce n'est pas une question de longue durée. Si vous ne laissez que temporairement une heure ou deux, ne vous inquiétez pas, l'ADN est stable et ne se dégrade pas.
Mais sachez que la température ambiante est maintenue pendant une longue période (disons plus de 24 heures), que les bandes peuvent commencer à devenir floues et que le risque de dégradation augmente progressivement. La dégradation est plus rapide si la température ambiante est élevée.
Stockage à court terme (par exemple, dans un jour ou deux), mettre au réfrigérateur 4 ℃, peut inhiber efficacement l'activité enzymatique et rester stable. La conservation à long terme (plusieurs mois ou plus) et la congélation à - 20 ° C ou - 80 ° C sont des pratiques courantes. Si les conditions le permettent, après purification avec un kit spécial, le gel est conservé, l'effet est meilleur et peut éviter les dommages causés par la congélation et la dégel répétées. Pour prolonger encore la durée de conservation des produits PCR, il est recommandé d'adopter une stratégie de stockage par congélation. Les produits sont conditionnés dans plusieurs tubes EP stériles, chacun contenant une quantité d'utilisation unique, ce qui permet d'éviter les risques de fractures de l'ADN résultant de congélation et de dégel répétés. Lors du fractionnement, vous devez faire attention à la centrifugation brève de l'embout du tube pour éviter la contamination par les résidus de gouttelettes. Pour les échantillons de grande valeur, une quantité appropriée de glycérol (concentration finale de 5 à 10%) peut être ajoutée au tampon, un cryoprotecteur qui réduit les dommages physiques causés à l'ADN par la formation de cristaux de glace.
Si les conditions de laboratoire sont limitées, on peut utiliser la méthode de précipitation à l'éthanol salé pour la conservation temporaire: ajouter 1 / 10 de volume d'acétate de sodium 3M et 2,5 fois le volume d'éthanol anhydre prérefroidi, après mélange à - 20 ° c. Cette méthode n'est pas aussi stable que la conservation par congélation professionnelle, mais peut maintenir l'intégrité de l'ADN pendant 1 à 2 semaines dans des situations soudaines telles que des coupures de courant, il suffit de centrifuger le nettoyage et de remettre en suspension après rinçage à l'éthanol à 70%.
Il est important de noter que les produits contenant des marqueurs fluorescents sont sensibles à la lumière et doivent être stockés à l'aide d'un tube à l'abri de la lumière, même dans un environnement de 4 ° C, enveloppé dans une feuille d'aluminium. Pour les échantillons nécessitant un transport transnational, une carte de conservation stable à l'ADN est recommandée, ce papier filtre spécialement conçu pour la taille d'une lame conserve les acides nucléiques à température ambiante pendant plusieurs mois et convient particulièrement aux scénarios d'échantillonnage sur le terrain.