Dans le domaine de la thérapie cellulaire, l'efficacité et la stabilité des cultures de cellules T ont un impact direct sur le succès ou l'échec des applications cliniques. Les plaques 96 puits et les plaques 6 puits servent de deux vecteurs de culture courants dont les différences de fonctionnement ne se reflètent pas seulement à l'échelle, mais concernent également les détails clés de la régulation du microenvironnement cellulaire.

1. Homogénéité de la vaccination cellulaire

Les propriétés à haut débit de la plaque 96 puits nécessitent une distribution plus précise de la suspension cellulaire. L'utilisation d'une pipette multicanaux couplée à une centrifugation à faible vitesse (200 × G, 5 min) est recommandée pour favoriser la sédimentation cellulaire et éviter les « Effets de bord» des pores de bord dus à la tension superficielle du liquide. Tandis que la plaque à 6 puits a un volume plus grand (2 - 4ml), il faut utiliser la « méthode de la planche à bascule croisée» pour mélanger manuellement et assurer une distribution uniforme des cellules.

2. Stratégie de remplacement du milieu de culture

96 puits plaque demi - quantité de changement de liquide est facile à perturber les cellules de la paroi, peut être incliné à un angle de 45 ° pour aspirer lentement vers le haut; Si vous utilisez un milieu sans sérum, une colle matricielle (par exemple Corning) doit être pré - ajoutée ® Matrigel) améliore l'attachement. Les plaques à 6 puits peuvent être remplacées à 50% du milieu d'abord par la « méthode de changement de liquide à gradient», puis complètement après 24 heures, réduisant ainsi le stress cellulaire.

3. Optimisation de l'échange de gaz

Un couvercle de plaque avec membrane respirante est recommandé pour la culture de plaques empilées 96 puits (par exemple greiner bio - one cellstar) ®）， Et contrôler l'empilement pas plus de 3 couches pour éviter le manque d'oxygène dans le trou central. La plaque à 6 puits peut être placée directement dans un incubateur à mélange humide contenant 5% de co₂, mais faites attention à la distance entre le bord de la plaque et le ventilateur de la boîte pour éviter une évaporation excessive locale.

4. Techniques de surveillance phénotypique

Les plaques 96 puits recommandent un balayage multipoint avec un système d'imagerie à haute connotation, tel que imagexpress micro, qui élimine automatiquement les données d'interférence de bulle via un algorithme d'IA. Les plaques à 6 puits sont mieux adaptées à la pré - amplification avant le tri en flux et la « méthode de ponction diagonale» est recommandée pour l'échantillonnage avec 3 ponctions successives le long de la diagonale avec une tête de pistolet de 1 mL pour assurer la représentativité de l'échantillon.

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