Cellules épithéliales du tube de popularité

Cellules épithéliales du tube de popularité

Propriétés fondamentales des cellules:

Introduction aux cellules:Cellules épithéliales du tube de popularitéSéparé du tissu trachéal; Trachée (trachea), partie des organes respiratoires; Tubulaire de type cylindre dont la paroi arrière est légèrement plane. L'extrémité supérieure aplatit le bord inférieur de la sixième Vertèbre cervicale, lié au cartilage annulaire; Descendez jusqu'à la jonction des quatrième et cinquième vertèbres thoraciques (plutôt le plan angulaire du sternum) et divisez les bronches principales gauche et droite, la fourche est appelée la fourche trachéale. La trachée est principalement constituée de 14 à 16 cartilages semi - annulaires, élastiques, le cartilage étant un anneau cartilagineux en forme de Glyphe « C », entaillé vers l’arrière, chaque anneau cartilagineux étant relié par un ligament, et le muscle lisse et le tissu conjonctif dense au niveau de l’entaille arrière de l’anneau, maintenu dans un état d’ouverture constante. La lumière est doublée d'une muqueuse dont la surface recouvre l'épithélium ciliaire, le mucus sécrété par la muqueuse peut adhérer aux particules de poussière de l'air aspiré, et les cils balancent constamment vers le pharynx pour expulser le mucus et la poussière afin de purifier le gaz aspiré. L'épithélium trachéal est la première ligne de défense des voies respiratoires pour le contact avec l'environnement extérieur, non seulement en tant que cellules cibles agissant sur divers agents pathogènes, médiateurs inflammatoires, mais également en tant que synthèse cellulaire effectrice, libérant de nombreux médiateurs inflammatoires et Cytokines, participant ainsi à l'inflammation des voies respiratoires et à la Réponse immunitaire. Les Cytokines épithéliales trachéales primaires cultivées in vitro présentent de grandes similitudes avec les tissus in vivo en termes de structure morphologique et d'activité fonctionnelle et sont donc extrêmement importantes dans la recherche fondamentale et clinique.

Conditionnement du paquet: collagène de queue de souris I (2 - 5 μg / cm2)

Milieu de culture: avec FBS, additifs de croissance, Penicillin, streptomycine, etc.

Fréquence de changement de liquide: tous les 2 - 3 jours

Sucs digestifs: 0,25%

Conditions de culture: phase gazeuse: air, 95%; CO2，5%

Méthodes de culture cellulaire primaire:

1. Préparation: Prenez toutes sortes de fournitures de culture stérilisées et placez - les sur le comptoir de purification, désinfectez par UV pendant 20 minutes. Lavez - vous les mains et essuyez les mains jusqu'aux coudes avec de l'alcool à 75% avant de commencer à travailler.

2. Disposition: Allumez la lumière d'alcool, installez le chapeau de paille.

3. Traitement des tissus: Placez le bloc de tissu dans un bécher, rincez avec le liquide de Hanks 2 ~ 3 fois, Enlevez la tache de sang; Si vous soupçonnez que les tissus peuvent être contaminés, vous pouvez d'abord placer dans un mélange contenant du cyan pendant 30 à 60 minutes.

4.cut: couper le tissu en morceaux de taille 2 ~ 3 mm avec des ciseaux ophtalmiques pour faciliter la digestion. Ajoutez 30 à 50 fois plus de liquide que la quantité totale de bloc de tissu, puis versez - le ensemble dans un ballon triangulaire, ligaturez l'embouchure de la bouteille ou Bouchez - la avec un bouchon de colle.

5. Digestion: ou avec un bain d'eau à température constante, ou dans un incubateur à 37 ℃ pour la digestion, la digestion doit être agitée toutes les 20 minutes, par exemple avec un agitateur électromagnétique à température constante pour une meilleure digestion. Le temps de digestion dépend de la taille du bloc de tissu et de la dureté du tissu.

6.separation: dans le processus de digestion voir la turbidité du suc digestif, vous pouvez aspirer une petite quantité de suc digestif sous le miroir, comme le tissu a été dispersé dans des masses cellulaires ou des cellules individuelles, terminer immédiatement la digestion, puis passer à travers un tamis en acier inoxydable approprié, filtrer les morceaux de tissu qui n'ont pas été suffisamment digérés. Centrifuger le suc digestif à basse vitesse (500 ~ 1000 tr / min) pendant 5 minutes, aspirer le surnageant et ajouter la bonne quantité de liquide de culture contenant du sérum.

7. Comptage: comptez avec la plaque de comptage, telle que la densité cellulaire de la suspension cellulaire est trop grande, après ajustement de la solution de culture de supplément, divisé dans le flacon de culture. Pour la plupart des cellules, les exigences de pH sont dans la gamme 7,2 ~ 7,4, le liquide de culture est légèrement rouge, comme la couleur jaunâtre, indiquant que le liquide devient acide et peut être ajusté par NaHCO3.

8. Culture: mettre dans un incubateur à 36,5 ℃, si cultivé avec un incubateur de CO2, le bouchon doit être dévissé d'un demi - tour.

Précautions:

1. La culture peut être conservée pendant 3 - 6 mois à 4 ℃.

2. Pendant la culture cellulaire, veuillez prendre soin de maintenir l'opération stérile.

3. Pendant la culture de passage, le temps de digestion ne doit pas être trop long, sinon il affectera l'application cellulaire et son état de croissance.

4. Il est recommandé aux clients de prendre plusieurs photos de cellules par multiple pendant les 3 premiers jours après la réception des cellules, d'enregistrer l'état des cellules, de faciliter et de technicité

Communication du Département opératoire; En raison du transport, des conditions instables peuvent survenir dans les cellules sensibles individuelles, veuillez nous contacter rapidement pour nous informer de manière exhaustive des spécificités des cellules afin que nos techniciens puissent les suivre, les revoir jusqu'à ce que le problème soit résolu.

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