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Étapes pré - expérimentales du kit ELISA pour souris
Date :2025-10-29Lire :3

SourisELISALes étapes pré - expérimentales du kit doivent être axées sur la manipulation des échantillons, la dilution des étalons et l'optimisation des conditions, et voici les principaux processus opérationnels:

Un,Préparation des échantillons

Le sérum/Plasma: coagulation à température ambiante10 à 20Centrifugation après minutes (2000 - 3000Tourner/Les points,20Minutes), recueillir le surnageant et éviter la précipitation.

Éclaircissement cellulaire: après centrifugation, les composants intracellulaires doivent être lysés par congélation et dégel à plusieurs reprises.

Échantillons de tissus: centrifugation après homogénation, conservation par portions- Oui.

Deux,Dilution des produits standard

Ajouter le brut standard à la dilution, laisser reposer10Mélanger après minutes, diluer selon le gradient d'instructions (par exemple1600 UI/mL).

Il est recommandé que la proportion de dilution soit validée par une pré - expérience pour s'assurer que la concentration de l'échantillon se situe dans la plage de détection.

Trois,Équilibre et dosage des réactifs

Kits et échantillons à température ambiante équilibrée60Minutes pour éviter que la température affecte la réaction.

Évitez les bulles lors de l'échantillonnage, les trous standard et les trous d'échantillon sont ajoutés séparément15 à 100μL, trous vides plus dilution- Oui.

Iv. Incubation et lavage

La première foisIncubation (3760 à 120Minutes) après, lavez la plaque3 - 5Une fois, chaque immersion1 - 2Minutes.

Incubation des anticorps marqueurs enzymatiques (3730 à 60Minutes) et le lavage est répété après.

Cinq,Rendu des couleurs et terminaison

rejoindreTMBRéaction d'évitement de la lumière du substrat10 à 15Minutes, liquide de terminaison (50μL/Trou) après la fin15Mesure en minutesODValeur.

Vi. Précautions

Recommandation pré - expérimentale: les échantillons à forte concentration doivent être validés par dilution pour éviter de dépasser la plage de référence.

Répétabilité: définissez au moins les pores pour garantir la fiabilité des résultats.

Avec ces étapes pré - expérimentales, vous pouvez vérifier les performances du kit, déterminer les meilleures conditions de fonctionnement et déterminer si votre échantillon est approprié pour une expérience formelle directe. Les pré - expériences, bien que prenant du temps et des réactifs, améliorent considérablement le succès des expériences formelles et la fiabilité des résultats.


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