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2788 Jinshan Avenue, Jinshan, Shanghai
Shanghai caresheng Industrial Co., Ltd
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SourisELISALes étapes pré - expérimentales du kit doivent être axées sur la manipulation des échantillons, la dilution des étalons et l'optimisation des conditions, et voici les principaux processus opérationnels:
Un,Préparation des échantillons
Le sérum/Plasma: coagulation à température ambiante10 à 20Centrifugation après minutes (2000 - 3000Tourner/Les points,20Minutes), recueillir le surnageant et éviter la précipitation.
Éclaircissement cellulaire: après centrifugation, les composants intracellulaires doivent être lysés par congélation et dégel à plusieurs reprises.
Échantillons de tissus: centrifugation après homogénation, conservation par portions- Oui.
Deux,Dilution des produits standard
Ajouter le brut standard à la dilution, laisser reposer10Mélanger après minutes, diluer selon le gradient d'instructions (par exemple1600 UI/mL).
Il est recommandé que la proportion de dilution soit validée par une pré - expérience pour s'assurer que la concentration de l'échantillon se situe dans la plage de détection.
Trois,Équilibre et dosage des réactifs
Kits et échantillons à température ambiante équilibrée60Minutes pour éviter que la température affecte la réaction.
Évitez les bulles lors de l'échantillonnage, les trous standard et les trous d'échantillon sont ajoutés séparément15 à 100μL, trous vides plus dilution- Oui.
Iv. Incubation et lavage
La première foisIncubation (37℃60 à 120Minutes) après, lavez la plaque3 - 5Une fois, chaque immersion1 - 2Minutes.
Incubation des anticorps marqueurs enzymatiques (37℃30 à 60Minutes) et le lavage est répété après.
Cinq,Rendu des couleurs et terminaison
rejoindreTMBRéaction d'évitement de la lumière du substrat10 à 15Minutes, liquide de terminaison (50μL/Trou) après la fin15Mesure en minutesODValeur.
Vi. Précautions
Recommandation pré - expérimentale: les échantillons à forte concentration doivent être validés par dilution pour éviter de dépasser la plage de référence.
Répétabilité: définissez au moins les pores pour garantir la fiabilité des résultats.
Avec ces étapes pré - expérimentales, vous pouvez vérifier les performances du kit, déterminer les meilleures conditions de fonctionnement et déterminer si votre échantillon est approprié pour une expérience formelle directe. Les pré - expériences, bien que prenant du temps et des réactifs, améliorent considérablement le succès des expériences formelles et la fiabilité des résultats.