Nom du produit Pour:Isolat de lymphocytes du sang périphérique humain

Spécifications du produit Pour:200 ml

Conditions de stockage:Pour:RT， Éviter la lumière

Période de validité:12 mois

Introduction au produit:Ce produit est un liquide isolant stérile à faible taux d'endotoxines utilisé pour isoler les lymphocytes du sang périphérique humain. Son principe de séparation est basé sur la différence de densité des cellules sanguines (la densité des globules rouges et granulocytes est1,090 g/mLGauche et droite; La densité des lymphocytes et des monocytes est1.075~1.090 g/mL; les plaquettes sont1.030~1.035 g/mL), une certaine densité de cellules est distribuée par centrifugation selon un gradient de densité correspondent, ce qui permet de séparer les lymphocytes du sang périphérique humain ou du sang de cordon ombilical.

Indicateurs de produits:Densité1.077±0,001g/mLPression osmotique290 ~ 350 mOsm / kg H2OStérile0.1μmFiltration sur membrane filtrante

Conditions de conservation:Ce produit est sensible à la lumière, devrait être stocké à température ambiante à l'abri de la lumière, durée de conservation1 Années. Après ouverture stérile, conserver à température ambiante.

Étapes opérationnelles:1. Prendre du sang total frais anticoagulé (EDTAAnticoagulation au citrate de sodium ou à l'héparine) ou du sang défibriné avec un volume égal de sang total et de dilution tissulaire ouPBSDiluer le sang total.2. Ajouter la bonne quantité de liquide de séparation dans le tube de centrifugation (lorsque le volume de sang après dilution est inférieur à3 mlLorsque, rejoindre3 mlSéparation du liquide; Supérieur ou égal à3 ml, ajouter un volume égal de liquide de séparation. Mais le volume total des deux ne peut pas dépasser les deux tiers du tube de centrifugation, sinon cela affectera l'effet de séparation), étaler le sang dilué au - dessus du niveau du liquide de séparation, en prenant soin de garder l'interface des deux niveaux claire. (le sang peut être aspiré à l'aide d'une paille de papeld, puis soigneusement étalé sur le liquide de séparation, en raison de la différence de densité entre les deux, une interface stratifiée distincte sera formée. Si l'échantillon est plus dosé pendant une période plus longue, il est normal que des masses de globules rouges s'affaissent avant la centrifugation.)

3. Température ambiante, rotor horizontal500~1000g, centrifugation20 à 30 minutes(plus le volume de sang a besoin de force centrifuge, plus la centrifugationPlus le temps, les meilleures conditions de séparation doivent être tâtonnées, la vitesse de centrifugation maximale ne dépasse pas1200g).4. Après centrifugation apparaîtra une stratification marquée: la couche supérieure est une couche de plasma dilué, au milieu une couche de liquide de séparation transparent, le plasma et les fractionsLa couche de membrane blanche entre les liquides de séparation est une couche de lymphocytes, et le fond du tube de centrifugation est constitué de globules rouges et de granulocytes.5. Aspirer soigneusement les cellules de la couche de film blanc à15 mlDans un tube de centrifugation propre,10 ml de PBSOu le liquide de lavage cellulaire lave les cellules de la couche de film blanc.250g, centrifugation10 minutes- Oui.6. Abandonner le nettoyage,5 mldePBSOu une solution de nettoyage cellulaire pour remettre les cellules en suspension,250g, centrifugation10 minutes- Oui.7. Répétez les étapes68. Abandonné, les cellules sont remises en suspension.

Pureté de séparation:La pureté de séparation des lymphocytes isolés à l'aide de lymphocytes humains separate Liquid est supérieure à90%- Oui.

Précautions:A.Mélanger à l'envers avant d'ouvrir, ce liquide de séparation est un produit stérile, afin de prolonger le temps de conservation du liquide de séparation, veuillez ouvrir le joint dans des conditions stériles pour éviter la contamination microbienne..B.Le liquide de séparation doit toujours être maintenu à la température ambiante lorsqu'il est utilisé (18℃~ 25℃), comme la température intérieure est basse, le liquide de séparation peut être préchauffé.4℃ ou la centrifugation dans des conditions de température inférieure peut entraîner une aggravation de la contamination des globules rouges dans la couche de film blanc.C.L'échantillon de sang est de préférence un anticoagulant frais (prélèvement sanguin)2 heuresÀ l'intérieur), afin de maintenir l'activité des lymphocytes, la congélation et la réfrigération doivent être évitées.D.Diluer le sang ou laver les cellules, ne peut pas être utilisé contenantCaEt,MgLes tampons et les fluides de culture ioniques, dont la composition provoque l'agglutination des cellules sanguines, réduisent considérablement la disponibilité et la pureté des cellules.E.Certains produits en plastique (par exemple, le polystyrène) en raison de l'effet électrostatique qu'ils portent, peuvent provoquer des cellules à accrocher les parois, ce qui affecte l'effet de séparation.F.La viscosité de l'échantillon de sang ou la différence de température peut affecter l'effet de séparation, peut ajuster le nombre de tours de centrifugation et le temps de centrifugation, tâtonner les meilleures conditions de séparation.G.Aspirer trop de couches de lymphocytes et de liquide de séparation peut provoquer l'aspiration des granulocytes à la jonction du liquide de séparation, augmentant ainsi le nombre de granulocytes mélangés; Aspirer trop de couches de plasma peut entraîner une contamination des protéines plasmatiques et des plaquettes dans les lymphocytes.H.Si les cellules isolées doivent être cultivées plus loin, lors de la collecte du sang et de la séparation, faites attention à la manipulation stérile pour éviter la contamination microbienne.J'ai.Le coefficient de séparation cellulaire et la charge cellulaire diffèrent selon le sang animal dans le liquide de séparation de poids spécifique différent, l'utilisateur doit fournir le poids spécifique du liquide de séparation requis, le genre de l'espèce animale et le nom de la cellule isolée lors de la formulation du liquide de séparation.